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免疫細胞のクラスター形成と増殖

免疫細胞のクラスター形成と増殖とは?

免疫応答の過程において、Tリンパ球のような免疫系活性化細胞は、感染や疾患と闘うため、急速に増殖します。また、活性化免疫細胞間(例:T細胞と抗原提示細胞との相互作用、T細胞同士の相互作用)で多くの相互作用が生じます。このような細胞数の動的変化や細胞間相互作用は、免疫応答の作用と範囲の調節に欠かせないものです。免疫細胞の活性化・増殖・調節のメカニズムを知ることが、新規の効果的な抗腫瘍免疫療法薬を開発するための手掛かりとなります。

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概要

IncuCyte® immune cell clustering & proliferation assays

IncuCyteクラスター形成・増殖性免疫細胞アッセイ

免疫細胞の相互作用と増殖をリアルタイムに可視化し、定量化します。既存のインキュベータ内で、免疫細胞の活性化(増殖)、調節および分化(クラスター形成)のメカニズムを観察できます。細胞の剥離や標識は必要はありません。

論文紹介

IncuCyte®論文ピックアップ

Zumwalde NA, Domae E, Mescher MF, Shimizu Y. ICAM-1-dependent homotypic aggregates regulate CD8 T cell effector function and differentiation during T cell activation. J Immunol, 191(7):3681–93, 2013

  • IncuCyte®リアルタイムイメージングと細胞集団解析を用いた、活性化T細胞凝集のメカニズム解明

"T細胞集団は、CD8陽性T細胞の機能と最終分化を調節することが知られている。これらの研究は、プライミング時のT細胞の相互作用およびクロストークの必要性の解明に役立つ。細胞集団を操作することで、ワクチンの有効性や抗腫瘍免疫療法薬の効果を向上させられる可能性がある"

Zumwalde, N. A. The Role of ICAM-1 Mediated T cell:T cell Interactions on CD8+ T cell Effector Function and Differentiation. PhD Dissertation, University of Minnesota (2013)

特徴

IncuCyteクラスター形成・増殖性免疫細胞アッセイのメリット

リアルタイムに可視化・自動解析

  • 培養物をインキュベータから取り出すことなく、増殖や細胞間クラスター形成相互作用をリアルタイムにモニタリング
  • 自動イメージング解析。操作が簡単なIncuCyte™画像解析ソフトウェアで、ラベルフリーの細胞集団をカウント
  • 画像とムービーから、表現型を明らかにするための手掛かりを収集

Label-free detection of T cell aggregation

ラベルフリーのT細胞凝集検出。抗CD3抗体とIL-2を用いてPBMCを活性化すると、T細胞の凝集、すなわち「クラスター形成」が誘導されました。ユーザーフレンドリーなIncuCyte™ソフトウェアにより、経時的な細胞のクラスター形成を正確に定量化することができます(青色マスク)。

既存インキュベータ内で経時的変化をモニタリング

  • 治験薬がどのように免疫細胞のクラスター形成・増殖の動態学に影響を及ぼすかを解明
  • 培養に影響を与えることがなく、すでにお手持ちのインキュベータ内で実験が完結

Measure clustering in real time

クラスター形成をリアルタイムに測定: 時間的経過を自動解析することにより、処理効果が明らかになりました。IL-2(10 µg/mL)の存在下で抗CD3抗体濃度を0.01 µg/mLから10 µg/mLに上げたところ、T細胞のクラスター形成が促進されました。

洗浄、細胞剥離、抗体標識が一切不要

  • 洗浄、細胞剥離、抗体標識が一切不要
  • 標識の必要なく増殖とクラスター形成を測定
  • 補足的なフローサイトメトリーやエンドポイントの生化学的測定に対応。アッセイが完了したら細胞/上清を回収するだけ

Real-time, label-free monitoring of PBMC proliferation

PBMC増殖をリアルタイムにラベルフリーでモニタリング: IncuCyte®システムは、144時間にわたって、抗CD3抗体およびIL-2により活性化したPBMCの増殖(黄色マスク)を自動で定量化します。抗CD3抗体+IL-2の存在下、抗CD3抗体の存在下、そして活性化因子の非存在下でのPBMC増殖の全時間的経過を提示します。

技術資料

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